m6a甲基化酶,m6a甲基化的现状-经验分享-釜正号

不能把“功劳”都算到m6A头上,FTO不仅仅是m6A去甲基化酶

1、不能把“功劳”都算到m6A头上，FTO的功能确实不仅限于作为m6A去甲基化酶。具体来说：FTO在m6A修饰中的角色：FTO最初被发现能够催化RNA上的m6A去甲基化，这是其在m6A修饰中的重要作用。然而，随着研究的深入，人们发现FTO的功能远比这更复杂。

2、然而，2017年，Samie Jaffrey教授的研究提出，FTO的作用底物可能是m6Am，而非m6A。m6A与m6Am在结构上非常相似，但功能和相应的甲基化酶至今未明。Jaffrey教授的研究发现，FTO通过调节mRNA的m6Am水平，影响RNA的稳定性和翻译效率。最近的研究进一步揭示了FTO的作用底物多样性。

3、去甲基化酶，如FTO和ALKBH5，负责去除已经甲基化的m6A。FTO，与肥胖相关，是已知的去甲基化酶之一，其异常与多种疾病有关。ALKBH5则在细胞核内对mRNA进行去甲基化，其独特的结构使其具有选择性。

m6A甲基化动态可逆和m6A甲基化的识别怎么理解?

m6A甲基化是动态可逆的，其状态可以随细胞状态和环境条件的改变而改变，体现了RNA分子的动态调控特性。识别m6A甲基化，主要依赖于meRIP-seq技术，通过特异性抗体富集和测序，能够准确鉴定m6A修饰位置。易基因科技自主研发的微量RNA甲基化检测技术，具有极低的样本起始量需求，仅需5μg总RNA即可实现有效检测。

其次，m6A甲基化并非静态存在，而是具有动态可逆性。这意味着m6A甲基化状态可以在RNA分子上进行添加和去除，这一过程受到多种因素的影响，如RNA结合蛋白的作用，为m6A甲基化的调控提供了可能。

总结：m6A甲基化是一个复杂而精细的调控过程，涉及多个关键分子的协同作用。通过动态可逆的m6A修饰，细胞能够精确地调控基因表达、RNA代谢和细胞功能，从而维持机体的正常生理活动。这一过程的异常与多种疾病的发生发展密切相关，为疾病治疗提供了新的潜在靶点。

m6A甲基化的基本概念是：在RNA分子，特别是信使RNA中，腺苷的第六位碳上的氮原子N6位置添加甲基的化学修饰。这是转录后过程的一种表现，发生在RNA合成后，并且是一个动态的可逆过程。m6A甲基化的作用过程包括以下几个关键步骤：编写器添加m6A修饰：核心成员：包括METTLMETTL1WTAP等蛋白质。

m6A甲基化是一个动态的可逆过程，包括“编写器”（m6A甲基转移酶）添加m6A修饰，“擦除器”（去甲基化酶）移除m6A修饰，以及“读取器”（m6A结合蛋白）识别这些修饰并介导其生物学功能。

m6a甲基化怎么研究

1、m6A甲基化的研究可从基础理论、研究方法和研究方向三方面展开。基础理论m6A甲基化修饰具有可逆性、动态性和时序性，可在不改变基因序列的前提下，对基因表达进行快速、精准的调控。

2、MeRIP-qPCR技术是在MeRIP-seq技术的基础上，通过定量PCR技术对特定基因或区域的RNA甲基化水平进行定量检测。技术流程：RNA片段化/富集：根据研究对象（如mRNA或lncRNA）的不同，对RNA进行特异性富集和打断。抗体孵育：使用m6A特异性抗体与RNA进行孵育，抓取有甲基化修饰的RNA片段。

3、数据分析：将测序数据比对到参考基因组/转录组上，检测RNA甲基化位点，并进行后续的生物信息学分析。MeRIP-qPCR技术 MeRIP-qPCR技术是一种基于MeRIP-seq技术的定量检测方法，用于验证MeRIP-seq结果或检测特定基因的m6A甲基化水平。

4、富集方式：根据研究对象的不同，选择使用oligodT磁珠富集或去除rRNA后再打断。结果计算：需要考虑IP到的RNA量与不IP直接保留的Input RNA量之间的差异，计算稀释倍数DF和IF，以准确评估m6A甲基化水平。

METTL3在m6A甲基化修饰中的作用机理是什么啊?

1、m6A甲基化发生在转录后，并富集于3非编码区域、5非编码区域和终止密码子附近的共识基序-RRACH基序（R表示A或G；H表示A、C或U），m6A修饰是可逆的，它的动态化调节过程包括三部分，分别是“writer”甲基化酶，”eraser”去甲基化酶以及“reader”甲基识别蛋白，它们分别执行着不同的功能。

2、m6A修饰，即N6-甲基腺苷修饰，是真核mRNA中含量最丰富的修饰之一。在头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）中，m6A修饰的研究揭示了其通过特定机制影响肿瘤进展的新发现。m6A修饰的基本概述 m6A修饰是由甲基转移酶样蛋白3（METTL3）、甲基转移酶样蛋白14（METTL14）和Wilms肿瘤相关蛋白（WTAP）共同添加的动态RNA化修饰。

3、其中，METTL3作为一种RNA甲基转移酶，催化甲基转移到RNA的N6 -腺苷，是这一过程的关键介质之一。METTL3在多种疾病的发生发展中扮演重要角色，比如癌症、心血管和神经系统疾病等。因此，研究METTL3的作用机制和抑制剂的发现，对理解这种酶的生物学作用并开发新治疗方法具有重要意义。

4、而在参与m6A甲基化修饰的酶中，METTL3为催化核心。早在2017年，剑桥大学Tony Kouzarides教授领导的一个团队就在Nature杂志上发表研究指出，METTL3酶在AML的发展和维持中发挥关键作用，并将该酶鉴定为AML的潜在治疗靶标。此次研究则进一步验证了这一靶点的有效性，并开发出了针对该靶点的药物STM2457。

5、综上所述，METTL3通过与eIF3h相互作用，使mRNA环化形成loop，提高核糖体循环利用效率，增强翻译效率。这一在终止密码子和5’端的成环机制可能提供更高效循环利用核糖体的方式，且与RNA的m6A修饰关系不大。这一发现为癌症治疗提供了新的视角。

6、Writer实验技术：针对甲基转移酶复合物（如METTL3）进行功能验证，检测其活性并分析其对基因表达的调控作用。研究方向基因表达调控：研究m6A在mRNA剪接、稳定性、运输和翻译中的作用，揭示其对基因表达的精细调控机制。